高效液相色谱方法步骤UHPLC：Thermo Scientific Ultimate 3000 RSLC
色谱柱：Thermo Scientific Hypersil Gold (50*2.1mm，1.9 µm）
流速：0.3 mL/min，进样体积：5 µL
流动相：A 相：2mM 的甲酸铵和 20 µL/ L 的甲酸水溶液 B 相：2mM 的甲酸铵和 20 µL/ L 的甲酸甲醇溶液
梯度洗脱：

质谱具体方法质谱仪：Thermo Scientific Q Exactive Focus台式高分辨质谱仪。 实验采用正负切换 Full MS-ddMS 2 扫描方式进行筛查分析，采 用正离子或负离子模式的 Full MS-ddMS 2 和 t-SIM- ddMS 2 进行定量分析，如图 1 所示。利用数据依赖扫描获得的二级子离子 碎片离子信息进行确证。
Full MS：分辨率为 70,000（FMHW@m/z 200）。
t-SIM：分辨率为 70,000（FMHW@m/z 200），isolation width 为 4 m/z
MS/MS 采集：17,500（FMHW@m/z 200）分辨率下数据依赖
采集；HCD NCE 为 45%，isolation width 为 4m/z

样件前补救技术参考文献 [1]，样品经 1% 的甲酸乙腈 / 水溶液浸提 15min 后，再震摇 1h 后，离心，过滤，供测定分析。

科学试验与谈话 在一定的 Mass tolerance 下，采用化合物加合离子峰的准确 质量数从 Fullscan 的数据中提取，获得 XIC 图谱。Q Exactive Focus 具有良好的质量精度，因此可以将提取窗口缩小至 5ppm，甚至更低，充分保证了方法极高的选择性。同时，Q Exactive Focus 可以实现快速的正负离子切换扫描，并在正负 切换的模式下保证高质量精度，在提高筛查实验通量同时，也 保证结果的准确（图 3）。详情请点击查看更多